石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-微量
產(chǎn)品貨號：EY-TG-42-50/100/200
包裝：50T/100T/200T
價格：2958/5756/11352
產(chǎn)品介紹
樣本直接提取無需脫蠟，方便用戶。在產(chǎn)品獨有的緩沖液體系的作用下， DNA從石蠟包被樣本中快速釋放，吸附于高性能的固相基質(zhì)，洗脫后即可獲 得高純度 DNA。提取到的核酸純度高于市場上的各種同類試劑盒，可適用于 多種下游應用。
存儲和穩(wěn)定性
試劑盒（Proteinase K、RNaseA 除外）儲存在環(huán)境溫度-40℃~40℃，相 對濕度不大于 75%，無腐蝕性氣體的避光處。Proteinase K（固體）和 RNaseA（固體）長期保存應置于 2~8℃。如兩酶溶解后未能短時間用 完，應分別按每次用量分裝成小份后-20℃保存?zhèn)溆谩１苊夥磸蛢鋈谠?成酶活力下降。
-保質(zhì)期：12 個月。
使用前準備
-閱讀說明書，備好必需的試劑和儀器。需自備的試劑、耗材有三氯甲 烷（氯仿）、無水乙醇、純水、PBS(10 mM，pH7.4，福爾馬林固定組 織選用)、1.5 ml 離心管等。全部離心均室溫進行。
-若低溫導致溶液 UL 析出沉淀，可在 50℃左右水浴中重新溶解，搖勻 后使用。
-首次使用前，向每瓶溶液 W2 中按瓶上標簽要求加入指定量的無水乙 醇（自備），搖勻后標記備用。每管 Proteinase K 或 RNase A 首次使 用前分別用 275 μl 純水（自備）完全溶解。
-盒中的 1.5 ml 離心管專用于收集步驟“9”的洗脫液，勿移用。
提取步驟
1．樣本處理
石蠟切片：取石蠟切片（5~10 μm 厚，1×1 cm2 大小）2~4 張于 1.5 ml 離 心管（自備）中。至步驟“2”。 石蠟塊：取刀片刮取或切成薄片的組織樣本 2~4 mg 于 1.5 ml 離心管（自 備）中，至步驟“2”。 注：盡量剔除石蠟(石蠟不會影響消化但是會使消化體積過大。另外盡量 不要使用蠟塊樣品表面長期暴露于空氣中的組織。 福爾馬林等固定液中的樣本：取樣本 2~4 mg，切為數(shù)塊，置于 1.5 ml 離 心管中。用 PBS 緩沖液重復清洗 3 次后，至步驟“2”。
PBS 清洗方法（單次）：向管中加入 500 μl PBS 緩沖液 (10 mM，pH7.4)， 渦旋振蕩混勻后最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 1 min， 棄去上清。
2.向樣本中加入溶液 UL 300 μl（樣本應完全浸沒于溶液 UL 中，必要時可 短暫離心），80 ℃孵育 60 min（期間每 15 min 取出混勻一次）。
3.取出離心管后將其冷卻至 56 ℃以下（室溫放置 2~ 3 min 即可），加入
Proteinase K 5 μl 及 RNaseA 5 μl，渦旋混勻。置 56 ℃孵育 60 min 或直 至組織完全消化。
4.加入三氯甲烷 300 μl，渦旋 15 sec，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以
上）離心 5 min。取出離心管，取上層清液至 1.5 ml 離心管（自備）中，
加入清液 1.1 倍體積的無水乙醇，渦旋混勻。 注意！勿吸入上層清液下的雜質(zhì)，雜質(zhì)會影響后續(xù)試驗。
5.將混勻液全部移入套有收集管的微量離心柱中，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或
13000 rpm 以上）離心 1 min。取出離心柱后棄去收集管中廢液，將離心 柱放回收集管中。
6.向離心柱中加入 250 μl 溶液 W2，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上） 離心 30 sec。取出離心柱后棄去收集管中廢液，將離心柱放回。
7.重復步驟“6”一次。
8.最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 2 min。
9.將離心柱取出并放入新的 1.5 ml 離心管中。向離心柱中加入 5~ 20 μl 溶液 TE，室溫靜置 2~3 min，最高轉(zhuǎn)速（12000 g 或 13000 rpm 以上）離心 1 min。 DNA 溶液即被收集在 1.5ml 離心管中。
注：將溶液 TE 預熱至 50~60℃時使用，可提高洗脫效率。
【注意事項】
-按說明書內(nèi)容進行操作，違規(guī)操作可能導致實驗失敗。
-盒中試劑如不慎濺到皮膚或粘膜時，立即用大量清水沖洗。
-僅用于科學研究。
