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植物細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品價(jià)格: 面議/人民幣 
最后更新: 2025-05-12 13:54:57
產(chǎn)品產(chǎn)地: 本地
發(fā)貨地: 本地至全國(guó) (發(fā)貨期:當(dāng)天內(nèi)發(fā)貨)
供應(yīng)數(shù)量: 不限
有效期: 長(zhǎng)期有效
最少起訂: 1
瀏覽次數(shù): 2
詢(xún)價(jià)  家家通會(huì)員產(chǎn)品
  • 公司基本資料信息
    • 河南歐諾生物科技有限公司
    • 邱曉亮先生 總經(jīng)理
    • 會(huì)員[家家通會(huì)員產(chǎn)品]
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    • 進(jìn)入商鋪
     
    產(chǎn)品詳細(xì)說(shuō)明
    • 產(chǎn)品貨號(hào):RF-Z321
      檢測(cè)范圍:
    • 產(chǎn)品規(guī)格:48T
      保存溫度:2~8°C
    • 目錄價(jià):¥1380

    本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷

    植物細(xì)胞色素P450CYP450)ELISA檢測(cè)試劑盒

    使用說(shuō)明書(shū)

    檢測(cè)原理

    試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被植物細(xì)胞色素P450CYP450)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物細(xì)胞色素P450CYP450)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

    樣品收集、處理及保存方法

    1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

    2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

    3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

    4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

    5.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    自備物品

    1. 酶標(biāo)儀(450nm)

    2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3. 37℃恒溫箱

      操作注意事項(xiàng)

    4.   試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。樣本在使用也要在室溫平衡60分鐘

    5.   實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

    6.   預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋?zhuān)苯尤?0μL加樣即可。

    7.   嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

    8.   所有液體組分使用前充分搖勻。

      試劑盒組成

    名稱(chēng)

    96孔配置

    48孔配置

    備注

    微孔酶標(biāo)板

    12孔×8條

    12孔×4條

    無(wú)

    標(biāo)準(zhǔn)品

    0.3mL

    0.3mL

    無(wú)

    樣本稀釋液

    6mL

    3mL

    無(wú)

    檢測(cè)抗體-HRP

    10mL

    5mL

    無(wú)

    20×洗滌緩沖液

    25mL

    15mL

    按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

    底物A

    6mL

    3mL

    無(wú)

    底物B

    6mL

    3mL

    無(wú)

    終止液

    6mL

    3mL

    無(wú)

    封板膜

    2張

    2張

    無(wú)

    說(shuō)明書(shū)

    1份

    1份

    無(wú)

    自封袋

    1個(gè)

    1個(gè)

    無(wú)

    注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:1000、500、250、125、62.5、0 nmol/mL.

    試劑的準(zhǔn)備

     20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

    洗板方法

    1.   手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

    2.   自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

      操作步驟

    3.   從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    4.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

    5.   待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;

    6.   隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    7.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

    8.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    9.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

      結(jié)果判斷

       繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn),按曲線(xiàn)方程計(jì)算各樣本濃度值。

       

      試劑盒性能

    10.  準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

    11.  靈敏度:最低檢測(cè)濃度小于1.0 nmol/mL

    12.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

    13.  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。

    14.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

    15.  有效期:6個(gè)月

      免責(zé)聲明

    16.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。

        嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。



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