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土壤硝態氮含量檢測試劑盒說明書 微量法
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號:4079
規格:100T/96S
試劑一:粉劑×2 支,4℃避光保存。臨用前根據用量每瓶加 1mL 濃硫酸充分溶解。試劑二:液體 40mL×1 瓶,4℃保存。
標準品:粉劑×1 瓶,4℃保存。10 mg 硝酸鉀,臨用前加入 1.386mL 蒸餾水溶解,配成 1000μg/mL
的 NO3--N 標準液
硝態氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,土壤中硝態氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接關系到作物的產量與品質。
在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應生成硝基水楊酸,在堿性條件下(PH>12)呈黃色,其顏色深淺與含量成正比,即可計算得硝態氮含量。
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調式移液槍、振蕩器、蒸餾水。
一、硝態氮提取:
按照土壤質量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 土樣,加入 1mL 蒸餾水)加入蒸餾水,置于振蕩儀中振蕩提 1h,25℃,10000 離心 10min,取上清待測。
1、 分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 410nm,蒸餾水調零。
2、 將 1000μg/mL NO3--N 標準液用蒸餾水 40 倍稀釋成 25μg/mL 的標準溶液。
3、 操作表:
試劑名稱 | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本(μL) | 8 | ||
標準溶液(μL) | 8 | ||
蒸餾水(μL) | 8 | ||
試劑一(μL) | 12 | 12 | 12 |
充分混勻,25℃靜置 30min | |||
試劑二(μL) | 280 | 280 | 280 |
混勻,渦旋振蕩,使出現的沉淀充分溶解,取 0.2mL 于微量玻璃比色皿或 96 孔板中測定 410nm 處吸光值 A,計算△A=A 測定管-A 空白管,△A 標準=A 標準管-A 空白管。 |
NO3--N 含量(μg/g 土壤)=△A÷(△A 標準÷C 標準)×V 提取÷W=25×△A÷△A 標準÷W。
W:樣本質量,g;C 標準:標準溶液濃度,25μg/mL;V 提取:提取液體積,1mL。
1、 試劑一配制好后盡快使用,4℃可保存一周。
2、 試劑一和試劑二均具有強腐蝕性,操作時需做好防護措施。
3、 △A 大于 1.5 時,建議將樣品稀釋后再進行測定。