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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性測試盒

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產品價格: 面議/人民幣 
最后更新: 2025-05-12 13:54:54
產品產地: 本地
發貨地: 本地至全國 (發貨期:當天內發貨)
供應數量: 不限
有效期: 長期有效
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  • 公司基本資料信息
    • 河南歐諾生物科技有限公司
    • 邱曉亮先生 總經理
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    • 手機13163721499
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    產品詳細說明
    • 產品貨號:4033
      檢測范圍:
    • 產品規格:50管/48樣
      保存溫度:2-8°
    • 目錄價:¥1200

    土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性檢測試劑盒說明書 微量法


    貨號:4033

    規格:100T/48S

    產品內容:

    試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存;

    試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2mL丙酮溶解,用不完的試劑仍-20℃保存; 試劑三:液體30mL×1 瓶,4℃保存;

    標準品:液體1mL×1支,5 mmol/L的對硝基苯酚溶液,4℃保存。臨用前用試劑一將標準品稀釋50倍得100μmol/L 的標準溶液。

    產品說明:

    土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶S-NAG是土壤微生物分泌的溶酶體中的一種酸性水解酶。其活性變化與機體某些病理狀態密切相關。

    S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。

    自備實驗用品及儀器:

    可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、30-50目篩(或更?。┖驼麴s水。

    操作步驟:

    一、樣本處理:

    新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30-50目篩。二、測定步驟:

    (1) 分光光度計/酶標儀預熱30min,波長調至400nm,蒸餾水調零。

    (2) 加樣表:

    試劑名稱

    測定管

    對照管

    標準管

    空白管

    風干土樣(g

    0.03

    0.03

    -

    -

    試劑一(μL

    165

    165

    -

    -

    試劑二(μL

    15

    -

    -

    -

    混勻,37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min蓋緊, 防止水分散失,流水/冰浴冷卻。

    -

    -

    試劑二(μL

    -

    15

    -

    -

    12000g 25℃離心10min,取上清液

    -

    -

    上清液(μL

    100

    100

    -

    -


    標準品(μL

    -

    -

    100

    -

    蒸餾水(μL

    -

    -


    100

    試劑三(μL

    200

    200

    200

    200

    室溫靜置2min 后,10000g 常溫離心5min,吸取200μL上清于微量玻璃比色皿或直接在96孔板中,測定400nm處的吸光值A。分別記為A測定管、A對照管、A標準管、A空白管。計算ΔA=A 測定管-A對照管,ΔA標準=A標準管-A 空白管。每個測定管設一個對照管。

    三、S-NAG 活力計算:

    單位的定義:每天每g土樣中產生1 μmol  對硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

    S-NAG活力(U/g 土樣)=ΔA÷ (ΔA標準÷C標準)×V 反總÷W÷T =0.432× ΔA÷ ΔA標準÷W。

    T:反應時間,1h=1/24dV  反總:反應體系總體積:1.8×10-4  LC標準:標準溶液濃度,100μmol/L; W:樣本質量。

    注意事項:

    1、當ΔA 大于 1 時,建議將上清液稀釋后進行測定;當ΔA 小于 0.02 時,建議延長反應時間。計算公式中注意乘以稀釋倍數或注意反應時間變化。



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