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當(dāng)前位置: 首頁(yè) » 供應(yīng)產(chǎn)品 » 儀器儀表 » 檢測(cè)儀器 »結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒(紫外分光光度法)

結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒(紫外分光光度法)

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產(chǎn)品價(jià)格: 面議/人民幣 
最后更新: 2025-05-12 13:54:53
產(chǎn)品產(chǎn)地: 本地
發(fā)貨地: 本地至全國(guó) (發(fā)貨期:當(dāng)天內(nèi)發(fā)貨)
供應(yīng)數(shù)量: 不限
有效期: 長(zhǎng)期有效
最少起訂: 1
瀏覽次數(shù): 4
詢(xún)價(jià)  家家通會(huì)員產(chǎn)品
  • 公司基本資料信息
    • 河南歐諾生物科技有限公司
    • 邱曉亮先生 總經(jīng)理
    • 會(huì)員[家家通會(huì)員產(chǎn)品]
    • 郵件756766029@qq.com
    • 手機(jī)13163721499
    • 電話(huà)
    • 傳真
    • 地址河南省鄭州市惠濟(jì)區(qū)大河路街道中原物流港B6-1-06
    • 進(jìn)入商鋪
     
    產(chǎn)品詳細(xì)說(shuō)明
    • 產(chǎn)品貨號(hào):4163
      檢測(cè)范圍:
    • 產(chǎn)品規(guī)格:25管/24樣
      保存溫度:2-8°
    • 目錄價(jià):¥2000

    結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

    注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。貨號(hào):4163

    規(guī)格:25T/24S50T/48S

    產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系工作人員。

    試劑名稱(chēng)/規(guī)格

    25T

    50T

    保存條件

    提取液

    液體 50 mL×1

    液體 100 mL×1

    4℃保存

    試劑一

    液體 20 mL×1

    液體 40 mL×1

    4℃保存

    試劑二

    粉劑×1

    粉劑×2

    4℃保存

    試劑三

    粉劑×1

    粉劑×2

    -20℃保存

    試劑四

    粉劑×1

    粉劑×2

    -20℃保存

    試劑五

    粉劑×1

    粉劑×2

    -20℃保存

    試劑六

    粉劑×2

    粉劑×4

    -20℃保存

    試劑七

    液體 250 μL×2

    液體 250 μL×3

    -20℃保存

    試劑八

    液體 12.5 μL×1

    液體 12.5 μL×2

    4℃保存

    溶液的配制:

    1 試劑四:臨用前每支加入 5 mL 試劑一。

    2 試劑五:臨用前每支加入 8 mL 試劑一。

    3 試劑六:臨用前取 1 支加入 208 μL 雙蒸水,充分溶解備用,用不完的試劑 4℃保存。

    4 試劑八:每支臨用前加入溶解好的 4 mL 試劑四。

    5 反應(yīng)液的配制:臨用前在試劑二中加入 7 mL 試劑一,緩慢加熱,逐漸升溫使其溶解,冷卻后加入試劑三混合溶解,這樣可以分兩批配制并且測(cè)定。

    產(chǎn)品說(shuō)明: 產(chǎn)品說(shuō)明:

    GBSSEC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。

    GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP;進(jìn)一步通過(guò)反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,通過(guò)340nm下測(cè)定NADPH的增加量,可以計(jì)算GBSS活性。

    注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者

    增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

    需自備的儀器和用品:

    紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

    操作步驟:

    一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))


    稱(chēng)取約 0.1g 組織加入 1mL 提取液,冰浴中勻漿。10000g 4℃離心 10min,棄上清,在沉淀中加入 1mL 取液充分混勻,置冰上待測(cè)。

    二、測(cè)定步驟

     

    1 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。

    2 EP管中按順序加入下列試劑

    試劑名稱(chēng)(μL

    測(cè)定管

    樣本

    200

    反應(yīng)液

    270

    混勻,30℃保溫20min,置沸水浴中1min(蓋緊,防止水分散失),冰浴冷卻

    試劑八

    150

    混勻,30℃保溫30min,置沸水浴中1min蓋緊,防止水分散失,冰浴冷卻,10000g 常溫離心10min,取上清液。37℃預(yù)熱試劑五和上清液。

    上清液

    450

    試劑五

    300

    試劑六

    15

    試劑七

    15

    混勻后立即在 340nm 波長(zhǎng)下記錄初始吸光度 A1 2min 后的吸光度 A2,計(jì)算 ΔA=A2-A1

    注意:試劑二如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混勻。三、GBSS 活性計(jì)算

    1、按樣本蛋白濃度計(jì)算:

    單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。GBSS活性(U/mg prot=[ΔA÷ε×d×V測(cè)]÷(Cpr×V÷V反總×V上清) ÷T =43.2×ΔA÷Cpr

    此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

    2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算:

    單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。GBSS活性(U/g 質(zhì)量)=[ΔA÷ε×d×V測(cè)]÷(W÷V提取×V÷V反總×V上清) ÷T=43.2×ΔA÷W

    V測(cè):測(cè)量體積,0.78mLV反總:反應(yīng)體積,0.62mLV提取:加入提取液體積,1mLT:反應(yīng)時(shí)間,20minε NADPH消光系數(shù),6.22×10-3mL/(nmol˙cm)d:石英比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本的量,0.2mLV上清:吸取上清液的量,0.45mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g



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