TIRF、共聚焦、FRET、光活化和顯微注射技術(shù)幫助科學(xué)家們克服了許多活細(xì)胞成像中的困難。所有技術(shù)的核心就是Ti，擁有這款強(qiáng)有力的新型倒置顯微鏡，您可以在尼康CFI60®光學(xué)系統(tǒng)的幫助下輕松使用上述技術(shù)。Ti系列共有三種型號(hào)，改進(jìn)的系統(tǒng)速度，提升的靈活性和高效多模式特點(diǎn)使Ti成為用于高端研究和活細(xì)胞成像的理想系統(tǒng)。

尼康世界領(lǐng)先的光學(xué)設(shè)計(jì)者開發(fā)了獨(dú)一無(wú)二的外部相差單元。使用這一革新系統(tǒng)，將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里，使用者不必使用相差專用物鏡來觀察相差圖像，并可以通過高數(shù)值孔徑物鏡來得到高質(zhì)量圖像。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到“全亮度”的熒光圖像。

將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設(shè)計(jì)，便于使用者使用高數(shù)值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像。根據(jù)所使用的物鏡，有四種類型的相差環(huán)可供選擇（Ti-E/U/S通用）。

使用尼康的高性能物鏡，包括60x和100xTIRF物鏡，具有世界最高1.49的數(shù)值孔徑，并且整合球差校正環(huán)，可以得到其它標(biāo)準(zhǔn)相差物鏡無(wú)法比擬的高分辨率相差圖像。

 

使用同款物鏡得到的“全亮度”熒光圖像由于沒有相差環(huán)導(dǎo)致的光線損失，在同一系統(tǒng)中，不僅可以進(jìn)行相差觀察，還可以得到更明亮的“全亮度”熒光圖像、共聚焦圖像和TIRF圖像。

 

通過外部相差單元，即使使用水浸物鏡也可以得到清晰、高分辨率的相差圖像。

由于相差圖像與TIRF觀察、DIC觀察可以使用同樣的物鏡，得到的圖像可用于高精確性數(shù)據(jù)處理和圖像分析，例如TIRF圖像的細(xì)胞輪廓定義。

具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設(shè)計(jì)可以在每個(gè)端口連接一個(gè)相機(jī)。另外分層結(jié)構(gòu)的擴(kuò)展空間設(shè)計(jì)可以加入一個(gè)后端口，這些特點(diǎn)方便用戶使用雙層熒光濾色塊盒和多相機(jī)進(jìn)行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口

使用可選的后端口設(shè)計(jì)擴(kuò)展了圖像獲取能力。與側(cè)端口結(jié)合使用可以用兩個(gè)相機(jī)獲取雙通道圖像。例如當(dāng)FRET (福斯特共振能量轉(zhuǎn)移)的熒光蛋白之間有觀察間隔、CFP和YFP的強(qiáng)度差別很大時(shí)，可以通過調(diào)節(jié)單個(gè)相機(jī)的靈敏度來得到高信噪比圖像進(jìn)行比較。

Ti采用的分層結(jié)構(gòu)充分利用了無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)，另外將PFS整合到物鏡轉(zhuǎn)換器。可以通過墊高塊在光路中引入PFS之外的兩個(gè)可選部件，利用該系統(tǒng)可以同時(shí)使用激光鑷、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動(dòng)熒光濾色塊盒可以單獨(dú)控制。

通過引入870nm的波長(zhǎng)阻擋裝置，研究者可以使用包括Cy5.5在內(nèi)的近紅外熒光染料。從紫外到紅外范圍內(nèi)的光學(xué)特性得到提升，可用的物鏡數(shù)目增加，在大范圍的應(yīng)用中都可以實(shí)現(xiàn)焦點(diǎn)穩(wěn)定，不管是在紫外范圍的Ca²⁺濃度測(cè)量還是紅外范圍的激光鑷。

對(duì)96孔板進(jìn)行三通道（雙通道熒光和相差）快速拍攝，速度提高2倍以上。

焦點(diǎn)漂移是時(shí)間序列觀察中最大的障礙。尼康的PFS系統(tǒng)對(duì)長(zhǎng)時(shí)間觀察過程中和加藥時(shí)可能出現(xiàn)的焦點(diǎn)漂移進(jìn)行校正。即使使用高倍物鏡或類似TIRF這樣的技術(shù)時(shí)也可以維持焦點(diǎn)。另外，在物鏡轉(zhuǎn)換器上整合PFS有助于節(jié)約空間，并不限制Ti的可擴(kuò)展分層結(jié)構(gòu)。 PFS采用高效光學(xué)補(bǔ)償系統(tǒng)，對(duì)Z軸平面進(jìn)行實(shí)時(shí)校正。不需要使用PFS時(shí)，也可以簡(jiǎn)單地將其撤出光路。

尼康最新研發(fā)的數(shù)字控制集線器通過減少部件之間的通訊時(shí)間，提高各附件的速度，進(jìn)而顯著提高整體的操作速度。 PC控制對(duì)Ti的電動(dòng)部件進(jìn)行優(yōu)化，縮短從動(dòng)作命令到移動(dòng)之間的反應(yīng)時(shí)間，從而對(duì)整體施行高速控制。 通過增加智能固件，電動(dòng)部件的整體操作時(shí)間顯著縮短，例如三通道（雙通道熒光和相差）連續(xù)圖像獲取需要的總時(shí)間大大縮短，減少了對(duì)細(xì)胞的光毒性。

同步控制若干電動(dòng)部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺(tái)，研究者可以進(jìn)行多維電動(dòng)實(shí)驗(yàn)。更快的附件運(yùn)動(dòng)和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間，減少相應(yīng)的光毒性，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù)。

操作和/或轉(zhuǎn)換物鏡、濾光塊、XY載物臺(tái)、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加，研究者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復(fù)制觀察條件，實(shí)現(xiàn)用鼠標(biāo)控制載物臺(tái)，整臺(tái)顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。

尼康優(yōu)化的光學(xué)技術(shù)提供多種模式觀察標(biāo)本，向研究者呈現(xiàn)細(xì)胞的每一個(gè)細(xì)節(jié)。

高對(duì)比度和高分辨率的平衡對(duì)于觀察細(xì)微結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。尼康獨(dú)有的DIC系統(tǒng)即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像。新型DIC滑塊（干）提供高分辨率和高對(duì)比度兩種選擇。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動(dòng)濾光塊盒內(nèi)，將DIC觀察和熒光觀察的切換時(shí)間顯著縮短。

相差圖像觀察時(shí)可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。該物鏡與傳統(tǒng)相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈，增強(qiáng)了圖像的對(duì)比度。

使用高NA的聚光鏡可以進(jìn)行暗場(chǎng)觀察。可以對(duì)微粒子進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的觀察，并避免光漂白。

HMC物鏡與HMC聚光鏡部件組合可以得到類似3D的高對(duì)比度、無(wú)光暈圖像，可以應(yīng)用于培養(yǎng)在塑料培養(yǎng)皿中的透明樣本。

新研發(fā)的物鏡對(duì)近紫外（Ca2+）到近紅外波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光都有高通透性，并且改進(jìn)了色差校正。在多種照明模式下都可以得到高質(zhì)量無(wú)色差的圖像。

新型20x物鏡加入尼康專有的VC物鏡系列，該物鏡的軸向色差校正至405nm，是用于共聚焦觀察和光活化技術(shù)的理想物鏡。

用于電動(dòng)操作的所有按鍵和控制轉(zhuǎn)換器設(shè)計(jì)都非常人性化，研究者可以不受到顯微鏡操作的影響，專注于研究。

 

熒光濾色塊的切換、物鏡轉(zhuǎn)換、Z軸粗/微調(diào)、PFS開/關(guān)控制、透射照明開/關(guān)控制都可以通過位于顯微鏡主體的按鍵進(jìn)行快速切換。

通過手柄或人機(jī)學(xué)控制器可以控制高速電動(dòng)XY載物臺(tái)和Z軸。

包括物鏡信息在內(nèi)的顯微鏡狀態(tài)和PFS的開/關(guān)狀態(tài)都會(huì)顯示在VFD屏上。調(diào)。

PFS的補(bǔ)償功能易于控制，只需一個(gè)按鍵就可以切換粗/微調(diào)。

通過遠(yuǎn)程控制面板可以操作顯微鏡，并確認(rèn)顯微鏡目前的狀態(tài)。另外可以通過預(yù)設(shè)按鍵來自動(dòng)切換觀察條件。只需單單一個(gè)按鍵就可以完成從相差到熒光觀察的切換。

 

將顯微鏡主體的前部稍稍向后傾斜，操作者眼點(diǎn)與標(biāo)本之間的距離縮短了約40mm，增強(qiáng)了可操作性。