CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測(cè)

CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測(cè)
CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測(cè)
CX23顯微鏡用于皮膚真菌檢測(cè)

     皮膚寄生蟲(chóng)檢測(cè)：皮膚寄生蟲(chóng)檢測(cè)一般包括病原學(xué)檢查方法、免疫學(xué)檢查方法和分子生物學(xué)檢查。

      1.病原學(xué)檢查：臨床上常取病人標(biāo)本置于玻片上，滴一滴生理鹽水或碘液，在光學(xué)顯微鏡下觀察寄生蟲(chóng)形態(tài)。病原學(xué)檢查是一種常用、簡(jiǎn)便的皮膚寄生蟲(chóng)檢測(cè)方法,但檢出率偏低，容易造成漏診。

      2.免疫學(xué)檢查方法：常見(jiàn)的包括皮內(nèi)試驗(yàn)和血清免疫學(xué)試驗(yàn)，靈敏度及特異性均較高。這些方法主要用于檢測(cè)寄生蟲(chóng)的特異性抗體，目前也已建立檢測(cè)蟲(chóng)體循環(huán)抗原或排泄抗原的方法，以作早期診斷及療效的考核。

         3.分子生物學(xué)檢查：DNA探針雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)部分寄生蟲(chóng)的DNA。此法對(duì)部分寄生蟲(chóng)進(jìn)行了分類鑒定，并對(duì)其重要功能基因進(jìn)行克隆和篩選，已成為診斷和研究寄生蟲(chóng)病的重要手段，但目前由于技術(shù)限制并未普及。

熒光染色法：熒光染色法通過(guò)使用化學(xué)熒光增白劑，與組織樣品的β-多糖物質(zhì)相結(jié)合，如纖維素、幾丁質(zhì)等。在熒光顯微鏡的紫外激發(fā)光下呈現(xiàn)熒光。通過(guò)熒光染料與真菌細(xì)胞壁及寄生蟲(chóng)的多糖成分非特異性結(jié)合，能夠?qū)φ婢图纳x(chóng)感染導(dǎo)致的各種疾病進(jìn)行檢測(cè)。早在上個(gè)世紀(jì)八十年代，就有研究者發(fā)現(xiàn)一種熒光增白劑能標(biāo)記真菌細(xì)胞壁的幾丁質(zhì)成分，并開(kāi)始使用熒光法檢測(cè)真菌。國(guó)內(nèi)外已經(jīng)有很多實(shí)驗(yàn)證實(shí)了熒光染色法具有陽(yáng)性率高的優(yōu)點(diǎn)。

          然而目前熒光染色法未能得到廣泛應(yīng)用，終其原因主要有以下幾個(gè)方面的問(wèn)題。首先，熒光染色法一般需要三種主要成分，包括熒光增白劑、氫氧化鉀和背景復(fù)染劑。熒光增白劑與組織中β-多糖成分相結(jié)合，產(chǎn)生熒光；氫氧化鉀能溶解樣品組織中的角質(zhì)、消除雜質(zhì)，并使組織透明；而背景復(fù)染劑能降低樣品組織的背景亮度，使熒光信號(hào)更加清晰。然而，由于熒光增白劑在強(qiáng)堿環(huán)境中穩(wěn)定性差，熒光素會(huì)發(fā)生析出沉淀現(xiàn)象；而且背景復(fù)染劑也會(huì)影響熒光增白劑的穩(wěn)定性，會(huì)引起檢測(cè)靈敏度的降低，甚至無(wú)法對(duì)真菌染色。因此，在現(xiàn)有技術(shù)下，熒光染色法所需的這三種染色液成分無(wú)法穩(wěn)定長(zhǎng)期共存，需分別配制儲(chǔ)存，染色時(shí)需要三個(gè)步驟才能完成，操作上相對(duì)繁瑣，染色時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，據(jù)早期文獻(xiàn)記載，整個(gè)染色過(guò)程需要20分鐘。隨著技術(shù)的進(jìn)步，現(xiàn)在市面上已經(jīng)有熒光染色兩步法的試劑盒，操作步驟得到簡(jiǎn)化，染色時(shí)間也相對(duì)縮短，但依舊無(wú)法達(dá)到臨床對(duì)真菌及皮膚寄生蟲(chóng)快速篩查的要求。其次，此方法對(duì)檢測(cè)的標(biāo)本具有局限性，只能溶解一些雜質(zhì)少的標(biāo)本，而對(duì)于痰液、厚甲標(biāo)本和大的腳皮，染色效果很差。因此此方法的臨床適用范圍得到限制。