Daudi-LUC

Daudi-LUC

Daudi-LUC(人Burkitt's淋巴瘤細胞)

產品基本信息

細胞名稱：Daudi-LUC(人Burkitt's淋巴瘤細胞)

種屬來源：人

組織來源：外周血;B淋巴母細胞;Burkitt's淋巴瘤

細胞形態：淋巴母細胞樣

生長特性：懸浮生長

培養基: RPMI-1640+10?S+1%雙抗

生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代方法：1:2至1:4，每周 3次

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

支原體檢測：無

注：該細胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml，培養過程中可不用再添加puro，如若擔心抗性隨著傳代時間降低，可定期用0.2ug/ml濃度puro維持。加藥需在細胞狀態良好情況下。

細胞培養操作

1)復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后輕輕吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心3-5min分鐘，棄去上清液，補加1-2ml培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，然后進行細胞計數。

b、根據細胞數量對應加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。