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糧食農(nóng)藥速測卡 咨詢電話:13612915744
糧食農(nóng)藥速測卡適用于糧食作物中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速檢測。它是用對農(nóng)藥高度敏感的丁酰膽堿酯酶和顯色劑做成的酶試紙,同時配備農(nóng)殘速測增強(qiáng)劑,可以進(jìn)一步提高了產(chǎn)品對有機(jī)磷農(nóng)藥的靈敏度,以滿足糧食農(nóng)藥殘留檢出限低的要求。糧食農(nóng)藥速測卡操作使用簡便、檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠、產(chǎn)品貯存容易、攜帶方便,是現(xiàn)場檢測的最佳方法。
1原理
丁酰膽堿酯酶對有機(jī)磷農(nóng)藥高度敏感,根據(jù)酶活性的抑制情況就可以檢測到微量的農(nóng)藥殘留。丁酰膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色),有機(jī)磷類農(nóng)藥對丁酰膽堿酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過程發(fā)生改變,由此可判斷出樣品中是否有過量有機(jī)磷類農(nóng)藥的存在。
含硫類有機(jī)磷殺蟲劑是糧食生產(chǎn)中比較常用的農(nóng)藥,多數(shù)毒性較高。采用溴制劑(農(nóng)殘速測增強(qiáng)劑)對糧食樣品提取液進(jìn)行氧化前處理,可以顯著降低這類農(nóng)藥的檢出限,提高丁酰膽堿酯酶對這類農(nóng)藥的檢測靈敏度。
2、試劑
2.1糧食農(nóng)藥速測卡:固化有丁酰膽堿酯酶和靛酚乙酸酯顯色劑的酶試紙(簡稱速測卡)。
2.2pH 7.8磷酸緩沖液:隨產(chǎn)品附送,每包用1000 mL純化水溶解。
2.3農(nóng)殘速測增強(qiáng)劑(溴制劑):隨產(chǎn)品附送。
3、儀器
3.1農(nóng)藥殘留速測儀。
3.2樣品粉碎機(jī)。
3.3礱谷機(jī)。
3.4電子天平(0.1 g)。
3.5超聲波清洗儀。
3.6低速離心機(jī)。
3.7可調(diào)移液器(10~100 μL,1~5 mL)。
4、分析步驟
4.1樣品處理
4.1.1把糧食樣品粉碎至95%以上通過20目篩(稻谷應(yīng)先脫殼),稱取10 g樣品,倒入提取瓶,加入30 mL pH 7.8的磷酸緩沖液混勻。
4.1.2用超聲波清洗儀超聲5 min,待溶液分層后取上層提取液2 mL于試管內(nèi),4000 r/min離心1 min;取1 mL上清液,加入50 μL農(nóng)殘速測增強(qiáng)劑,備用。
4.2檢測過程
4.2.1將農(nóng)藥殘留速測儀接通電源,開機(jī)預(yù)熱,溫度達(dá)到40℃后,設(shè)定預(yù)反應(yīng)時間為10min,顯色時間為3min。
4.2.2取出糧食農(nóng)藥速測卡,先對折一下形成折痕,然后插入農(nóng)藥殘留速測儀的卡槽中(白片在下,紅片在上)。先取80 μL pH 7.8磷酸緩沖液加到空白對照卡的白色藥片上,然后依次取80 μL糧食樣品提取液分別加到其余的白色藥片上,按下開始鍵,預(yù)反應(yīng)10 min。
4.2.3聽到鳴音提示后將農(nóng)藥殘留速測儀上蓋合下來,使白色藥片和紅色藥片充分接觸,發(fā)生顯色反應(yīng)3min。
4.2.4再次聽到鳴音提示后將農(nóng)藥殘留速測儀上蓋打開,觀察顯色反應(yīng)的結(jié)果,以空白對照卡所顯藍(lán)色作為標(biāo)準(zhǔn),判斷糧食樣品的檢驗結(jié)果。
4.2.5如果沒有條件配置農(nóng)藥殘留速測儀,也可以直接用手代替儀器進(jìn)行檢測,放置10 min預(yù)反應(yīng)后,用手對折捏3 min,打開觀察結(jié)果。用手操作,容易受環(huán)境溫度和各人手溫影響。
5、結(jié)果判定
結(jié)果以丁酰膽堿酯酶被有機(jī)磷類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(為陰性)表示。
與空白對照卡比較,糧食樣品速測卡的白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果。
對測定結(jié)果為陽性的樣品,應(yīng)重復(fù)檢驗2~3次,進(jìn)一步通過其他分析方法確定具體農(nóng)藥種類和含量。
如果空白對照卡沒有顯示藍(lán)色,說明檢測不正常,可能是速測卡失效或者環(huán)境中有相關(guān)農(nóng)藥和干擾物質(zhì)存在,或者是加樣的量不夠,需要排除有關(guān)問題后再進(jìn)行檢測。
6、附則
6.1 糧食農(nóng)藥速測卡技術(shù)指標(biāo)
6.1.1靈敏度指標(biāo):糧食速測卡對部分農(nóng)藥的檢出限見表1。
表1 部分農(nóng)藥的檢出限
農(nóng)藥名稱 檢出限/(mg/kg) 農(nóng)藥名稱 檢出限/(mg/kg) 農(nóng)藥名稱 檢出限/(mg/kg)
乙酰甲胺磷 0.4 水胺硫磷 0.1 甲拌磷 0.1
二嗪磷 0.2 馬拉硫磷 0.5 磷胺 0.1
敵瘟磷 0.1 甲胺磷 0.6 辛硫磷 0.6
乙硫磷 0.2 久效磷 0.08 甲基嘧啶磷 0.2
殺螟硫磷 0.5 對硫磷 0.2 喹硫磷 0.2
倍硫磷 0.2 甲基對硫磷 0.1 三唑磷 0.2
樂果 2.0 敵敵畏 0.01 甲基毒死蜱 0.2
敵百蟲 0.1 毒死蜱 0.2 特丁硫磷 0.1
6.1.2符合率:檢出的30份以上陽性樣品中,經(jīng)氣相色譜法等方法確證,陽性結(jié)果的符合率應(yīng)達(dá)到80%以上。
7、說明
7.1丁酰膽堿酯酶速測卡對有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥非常敏感,測定時如果附近噴灑農(nóng)藥或使用衛(wèi)生殺蟲劑,以及操作者或器具沾有微量農(nóng)藥,都會造成對照和測定藥片不變藍(lán)。
7.2紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時間以3min為準(zhǔn),3min后藍(lán)色會逐漸加深,24h后顏色會逐漸褪去。
7.3農(nóng)殘速測增強(qiáng)劑具有腐蝕性、刺激性和揮發(fā)性,使用過程中要注意及時擰緊瓶蓋。