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人副流感病毒IgG抗體(HPIVs IgG)定性檢測試劑盒(ELISA)

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產(chǎn)品價格: /人民幣 
最后更新: 2018-04-19 14:28:02
產(chǎn)品產(chǎn)地: 湖北黃石
發(fā)貨地: 湖北黃石 (發(fā)貨期:當天內(nèi)發(fā)貨)
供應(yīng)數(shù)量: 不限
有效期: 長期有效
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  • 公司基本資料信息
  •  
    產(chǎn)品詳細說明

     

    僅供科研使用,不得用于臨床檢驗。

     

    人副流感病毒IgG抗體(HPIVs IgG)定性檢測試劑盒(ELISA

    說明書

     

     

    貨號:INS1020201

     

     

        使用前,請務(wù)必仔細閱讀說明書,如有不清楚的,請撥打24h技術(shù)支持專線:0714-633855818171667592/18108699172,咨詢清楚再進行實驗。

     

     

    黃石市艾恩斯生物科技有限公司

    網(wǎng)址:www.inselisa.com

    電話:0714-6338558

     


    【產(chǎn)品名稱】

    通用名稱:人副流感病毒IgG抗體(HPIVs IgG)定性檢測試劑盒(ELISA

    英文名稱:Human HPIVs IgG ELISA KIT

     

    【包裝規(guī)格】

    48人份/盒,96人份/

     

    【預(yù)期用途】

    僅供科研使用,定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中是否含有人副流感病毒IgG抗體。

     

     

    【檢驗原理】

    本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預(yù)包被人副流感病毒IgG抗體抗原(固相抗原,貨號:INS1020201C)的微孔酶標板中,加入人副流感病毒IgG抗體陰陽性性對照(貨號:INS1020201J)和待測樣本,溫育洗滌,再加入另一株HRP標記的抗人副流感病毒IgG抗體抗體(酶標抗體,貨號:INS1020201E),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗原-抗體-酶標抗體的夾心復(fù)合物。加底物AB,底物在HRP催化下,產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標儀上測定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測樣品中人副流感病毒IgG抗體的濃度正相關(guān),通過計算公式判斷樣品陰陽性。

     

    【主要組成成分】

    主要成分

    組分

    數(shù)量

    主要成分

    陰性對照

    0.5ml/

    不含待測物的緩沖液

    陽性對照

    0.5ml/

    含待測物的緩沖液

    包被微孔板

    96T

    預(yù)包被固相抗原

    HRP標記抗體

    6mL

    HRP標記的檢測抗體

    底物液A

    6mL

    過氧化脲工作液

    底物液B

    6mL

    TMB工作液

    終止液

    6mL

    硫酸稀釋液

    20×濃縮洗滌液

    30mL

    0.15%Tween20PBS

    說明書

    1

    --

    自封袋

    1

    --

    不干膠

    2

    --

    陰陽性對照已經(jīng)通過測試,結(jié)果表明HBs抗原陰性,HIV1HIV2HCV抗體陰性,由于不存在一種試驗方法能夠完全保證沒有這些物質(zhì),本品必須按照具有潛在的感染性進行處理,處理過程應(yīng)當遵循通用的安全措施。

     

    需要但未提供的材料及耗材

      1、酶標儀

    2、精密移液器及一次性吸頭

    3、蒸餾水

    4、洗瓶或者自動洗板機

    5、37℃水浴鍋或恒溫箱

    6、500ml量筒

    7、無粉一次性乳膠手套

    8、質(zhì)控品(可以從艾恩斯生物選擇,貨號:INS1020201Q)

     

    【儲存條件及有效期】

      1、2-8℃保存,切勿冷凍,有效期6個月。

      2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

      3、開封后,按照建議的條件保存,校準品、包被微孔板和HRP標記抗體,有效期為28天,其他成分在標簽標明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。

     

    【適用儀器】

      半自動的酶標儀,如Thermo MK3,或者國產(chǎn)酶標儀。

     

    【樣本要求】

      樣本類型和采集

    以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

    1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm條件下離心20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。

    2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。

    3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。

    樣本保存和穩(wěn)定性

    樣本在2-8℃條件下,可以儲存72h,或者在- 20儲存6個月。樣本收集后,不是一次檢測完,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。


    【檢驗方法】

    試劑準備

    1、使用前,所有的組分都要至少復(fù)溫2h,確保充分復(fù)溫到室溫。

    2、濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液,會有結(jié)晶產(chǎn)生,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋,即1份的濃縮洗滌液,添加19份的蒸餾水。

    3、底物:底物液AB,在使用前,按1:1體積充分混合,混合后15分鐘內(nèi)使用。


    操作程序

    1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。

    2、按前面試劑準備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。

    3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。

    4、設(shè)置陰陽性對照孔、樣本孔,陰陽性對照孔各加對照品50μL,樣本孔加樣本50μL

    5、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min

    6、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。

    7、所有孔加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL

    8、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min

    8、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。

    9、將底物AB1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min

       10、所有孔加入終止液50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD值)。

     

    【檢驗結(jié)果的解釋】

    檢測完成后,以陰性對照的OD+0.25,做為閾值,樣本OD值大于閾值,為陽性;樣本OD值低于閾值為陰性。


    【檢驗方法的局限性】

    1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。

    2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品不得使用。

    3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。

    4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。

    5、如果樣本值高于最高標準品濃度值,請將樣本適當稀釋后,再重新測定。

    6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果,檢測前,請排除該因素。

    7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。

     

    【產(chǎn)品性能指標】

    1、物理性能

    試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,無破損漏氣。

    2、陰性結(jié)果

    陰性對照的OD值不高于0.2

    3、陽性結(jié)果

    陽性對照的OD值不低于0.8

    4、特異性

    本試劑盒識別天然和重組人副流感病毒IgG抗體,與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。

    5、穩(wěn)定性

        2℃-8℃保存,有效期6個月。

     

    【注意事項】

    生物安全

    1、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定,嚴格防止交叉污染,所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進行處置。

    2、試劑盒的液體組分中,含有proclin-300防腐劑,可能引起皮膚過敏反應(yīng),避免吸入煙霧與皮膚接觸。

    3、底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入煙霧。戴上防護手套,實驗完成后徹底洗手。

     

    技術(shù)提示

    1、混合蛋白溶液時,避免起泡。

    2、加校準品與樣本時,每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。

    3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件。

    4、底物溶液為無色液體,保存過程中變?yōu)樗{色,代表底物溶液已經(jīng)失效,不得使用。

    5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,加入終止液后,藍色底物產(chǎn)物,會瞬間變?yōu)辄S色。

    6、實驗中,用剩的板條,應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

    7、所有液體組分,使用前充分搖勻,嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作。

     

    廢物處理

      所有使用或未使用的試劑,所有污染性的一次性材料,應(yīng)當遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序,每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別,進行廢物和污物的處理,同時要嚴格依照有關(guān)規(guī)定對待所有的廢物和污物。

     

    【基本信息】

      企業(yè)名稱:黃石市艾恩斯生物科技有限公司

      生產(chǎn)地址:湖北省黃石市黃石港區(qū)磁湖路41

      固定電話:0714-6338558

      網(wǎng)    址:www.inselisa.com

      郵    箱:postmaster@inselisa.com


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