摘要
光照培養箱作為植物組織培養、微生物育種、種子發芽試驗的核心設備，其內部環境的潔凈度直接決定實驗材料的存活率與實驗數據的真實性。箱內高濕、恒溫及光照環境極易滋生霉菌、細菌等微生物，造成樣品交叉污染。本文以標準化文檔形式，系統梳理光照培養箱的物理滅菌、化學滅菌及聯合滅菌三大類核心方法，詳細闡述紫外線照射、高溫干熱、過氧化氫熏蒸、酒精擦拭等主流滅菌方式的操作流程、適用場景及注意事項，建立 “日常消毒 - 定期滅菌 - 深度清潔” 的三級防護體系。全文約 1500 字，旨在為實驗室提供科學、安全、高效的滅菌實操指南，保障設備處于無菌運行狀態。
一、引言
光照培養箱集成了光照強度控制、恒溫恒濕調節等功能，為植物細胞、微生物提供了模擬自然的生長條件。然而，這種溫暖、潮濕、富含營養（如植物組培苗滲出液）的環境，也是雜菌快速繁殖的 “溫床”。一旦滅菌不徹底，雜菌不僅會與目標樣品爭奪營養，還會釋放代謝產物干擾實驗結果，甚至導致整批實驗材料腐爛報廢。
與普通恒溫培養箱不同，光照培養箱因含有光敏元件、塑料材質的光照架和密封條，對滅菌劑的腐蝕性和滅菌溫度有嚴格限制。因此，選擇合適的滅菌方法，在殺滅雜菌的同時保護設備核心部件，是實驗室管理的關鍵課題。本文結合儀器特性，制定分場景的標準化滅菌規程，確保實驗安全與設備安全。
二、物理滅菌法：日常消毒與快速滅菌
物理滅菌法具有無化學殘留、操作便捷的特點，適用于日常使用后的快速處理，是光照培養箱滅菌的基礎手段。
（一）紫外線照射滅菌法
該方法利用紫外線破壞微生物的 DNA 結構，適用于箱體內表面、風道及光照架的日常消毒。操作時，首先清空箱內所有樣品與培養架，用濕布擦拭表面灰塵（避免灰塵阻擋紫外線）；隨后關閉箱門，開啟紫外線燈，設定照射時間為 30-60 分鐘。需注意，紫外線穿透力極弱，需定期調整燈管位置，確保箱體死角均能被照射；同時，紫外線對人體皮膚和眼睛有傷害，滅菌期間嚴禁打開箱門。建議每 3 個月更換一次紫外線燈管，以保證滅菌效能。
（二）高溫干熱滅菌法
利用高溫使微生物蛋白質變性，適用于無塑料部件的內膽深度清潔。由于光照培養箱的密封條和傳感器多為不耐高溫材質，嚴禁使用超過 60℃的高溫。操作流程為：清空箱體后，開啟設備的加熱功能，將溫度設定為 55℃-60℃，同時關閉加濕功能，運行 2-3 小時。高溫結合干燥環境可有效抑制霉菌孢子萌發，殺滅大部分細菌。此方法需嚴格監控溫度，防壞控溫探頭及光照系統線路。
三、化學滅菌法：深度滅菌與污染處理
當發生嚴重污染或進行重大實驗前，需采用化學滅菌法進行深度處理。操作時必須嚴格做好個人防護，并確保徹底通風，防止化學試劑腐蝕設備或影響實驗樣品。
（一）75% 酒精擦拭滅菌法
這是針對光照培養箱最安全、最常用的化學滅菌手段，適用于內膽、培養架、傳感器及箱門密封條。操作時，用無菌紗布蘸取 75% 醫用酒精，仔細擦拭箱體內壁、隔板、層架及風道，重點清潔角落、縫隙及容易堆積污垢的部位。對于塑料材質的光照板，應輕輕擦拭，避免酒精過量滲入線路接口。擦拭后，關閉箱門熏蒸 15 分鐘，再打開箱門通風 30 分鐘，待酒精完全揮發后方可使用。
（二）過氧化氫低溫等離子滅菌法
適用于對無菌要求極高的高端實驗，可有效殺滅芽孢和真菌。需使用專用的過氧化氫滅菌劑或霧化設備。操作時，將滅菌劑放置于箱體中央，關閉箱門并確保密封良好，啟動霧化裝置，使過氧化氫蒸汽充滿箱體，作用時間約為 60-90 分鐘。滅菌結束后，必須開啟設備的強排風扇或打開箱門通風至少 1 小時，直至無刺激性氣味。注意： 高濃度過氧化氫可能對部分橡膠密封條有老化作用，建議滅菌后在密封條上涂抹少量醫用凡士林進行保養。
（三）高錳酸鉀甲醛熏蒸法（慎用）
該方法滅菌效果，但因甲醛具有強致癌性且難以徹底清除，僅在發生嚴重霉菌污染且其他方法無效時使用。操作時需嚴格遵循實驗室危化品管理規定，熏蒸后需用氨水進行中和，并通風換氣 24 小時以上。鑒于其高風險性，在光照培養箱（含精密電子元件）中應盡量避免使用。
四、聯合滅菌體系與操作禁忌
為兼顧滅菌效果與設備壽命，建議建立 “三級聯合滅菌體系”：每日實驗結束后，采用 75% 酒精擦拭結合紫外線照射 30 分鐘；每周進行一次 55℃高溫干熱滅菌；每月或實驗污染后，進行一次過氧化氫低溫等離子深度滅菌。
在滅菌操作中，需嚴格遵守以下禁忌：第一，嚴禁使用含氯消毒劑（如 84 消毒液），其強氧化性會嚴重腐蝕不銹鋼內膽和金屬部件；第二，滅菌前必須移除所有植物樣品和培養基，防止滅菌劑對樣品造成損傷；第三，涉及電氣部件（如光照燈座、傳感器）時，避免液體滅菌劑直接噴淋，防止短路故障。
五、結論
光照培養箱的滅菌工作是一項系統性工程，核心在于 “預防為主，分級處理”。日常操作中，應將酒精擦拭和紫外線照射作為常態化工作，及時清除潛在污染源；在面對高要求實驗或嚴重污染時，需科學選用高溫或過氧化氫等深度滅菌方法。
實驗室管理人員需根據實驗材料的敏感性和設備的材質特性，靈活選擇滅菌方案，嚴格執行操作流程，做好滅菌記錄。只有建立科學、規范的滅菌制度，才能從源頭上杜絕交叉污染，保障植物組培、微生物培養等實驗的順利進行，同時最大限度延長光照培養箱的使用壽命。